常规PCR

GPV8 超保真 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶 ，携带具有持续合成能力的 DNA 结合域 ，能够提高反应速度、保真 度和稳定性。该酶具有超快的扩增速度，15-30s/kb， 同时 PCR 产量比传统 pfu 酶高 50%-100%，其次其错配率比 Taq DNA 聚合酶低 50 倍 ，比 Pfu 低 6 倍，这些优点使之成为克隆或其他需要高保真性实验的首选。PCR 产物为平末端，产 物可直接用于平末端连接或平末端 Topo克隆 ，也可用 GenRec 重组试剂盒组装多个基因片段。 随酶提供 10× PCR 缓冲液 ，内含 MgCl2 (终浓度为 2.0mM)。可以使用随酶提供的 DMSO 或 MgCl2 对反应进行优化。对 于高 GC 或有复杂二级结构的序列，可以加入 DMSO 提高反应效率，建议 50ul 添加 1.5ul（终浓度为 3%），如果有螯合 剂（如 EDTA）存在时 ，需要提高 Mg2+浓度 ，按 0.5mM 浓度逐步提升 ，优化反应。